另以不掺分泌物的黑附化学PDA平板为对照,通过分泌物掺入和菌饼接种培养,球菌观察不同霉菌在PDA平板上的分泌生长情况(图1),测量并计算掺入分泌物对霉菌平板生长的广谱抑制效果(表1)。 由表1和图1可以清楚地看出,抗霉YP1外分泌物对各种供试霉菌具有非常显著的菌活抑制效果,对酵母也有很好的性和性分析抑制效果,其中白地霉的成分生物学特征介于普通霉菌和酵母菌之间,繁殖方式为裂殖,多样形成节孢子,黑附化学酿酒酵母为芽殖,球菌不形成孢子。分泌由表1可知,广谱霉菌在添加分泌物的抗霉PDA平板上菌落生长受到显著抑制,可以肯定的菌活一个原因是孢子萌发受到了抑制,因为霉菌主要依靠形形色色的孢子进行繁殖扩张,孢子数量庞大,孢子萌发受到抑制,自然会大大抑制其菌落生长速度,但霉菌的菌丝生长是否也受到了分泌物的抑制,尚无法判定。 为搞清楚真菌的菌丝生长是否受到分泌物的抑制,我们又对一些植物病原真菌和食用菌进行了平板培养。这些真菌有个共同特点,即其菌丝生长和孢子形成时间间隔明显,只有菌丝体生长到一定阶段才会有孢子的形成,尤其是食用菌,在平板培养条件下只有菌丝体营养生长,无法形成孢子,平板培养的结果见表2。表2清楚地表明,产孢越早越多的真菌菌落生长受到分泌物的抑制越严重,产孢越晚越少的真菌菌落生长受到分泌物的抑制越轻微,而在平板培养中不形成孢子的食用菌菌落的生长不受分泌物的影响。以上表明,YP1外分泌物对真菌菌丝的生长没有影响,分泌物抑制真菌生长是通过抑制孢子萌发实现的。 5、拮抗菌株 YP1外分泌物的化学组成分析经高压液相色谱分离和质谱仪分析,共分离获得10种组份(图2),其中鉴定出3种组份,未鉴定出的组份有7种(表3)。鉴定出的三个组份均为由C、H、N、O组成的富N有机化合物(分子中含7~8个N原子),未鉴定出的7种化合物很可能属于新化合物。
黑附球菌本身是一种腐生真菌,广泛存在于空气、土壤及植物体表面,黑附球菌不同菌株之间存在着强烈的多样性,这种多样性不仅体现在不同的菌株分离物表型的多样性上,还体现在不同的菌株可以产生不同种类的次生代谢产物,在工业、医药和生物控制领域具有很大的应用潜力。然而,迄今报道的由黑附球菌菌株产生的广谱抗真菌物质仅有黄柄曲菌素,其他菌株产生的抗菌化合物都只能对少数种类的真菌产生拮抗作用,比如Ferdinand等(2013)从可可树中分离的一株内生Epicoccum菌株发酵液产生三种聚氧聚酮化合物,epicolactone和epicoccolideA与B,由C、H、O三种元素组成,对终极腐霉、螺壳状丝囊霉、立枯丝核菌三种植物病原真菌的菌丝体生长具有显著的抑制效果。 三、讨论 本研究中获得的YP1菌株外分泌物具有显著的抗霉菌活性,同时对多孢子植物病原真菌也具有很好的拮抗效果,其抑制多孢子真菌的主要机制是抑制孢子萌发,在果蔬、食品的保鲜防腐以及植物病害的防治领域显示出很好的应用潜力。YP1菌株外分泌物由多达10种化学成分组成,再一次证实了黑附球菌个体菌株之间存在着强烈的代谢多样性,是目前发现的次生代谢产物最为丰富的真菌种类之一,是难得的微生物天然产物资源,在工业、医药和生物控制领域具有很大的应用潜力,成为相关研究的热点。本项目组下一步的重点研究工作是对YP1菌株外分泌物各组分的化学结构进行精确解析,并进一步优化发酵条件,提高分泌物发酵产量,为实际应用奠定基础。 说明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系 相关链接:霉菌,黄柄曲菌素,酵母菌 |
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